中国口腔颌面外科杂志 ›› 2012, Vol. 10 ›› Issue (5): 354-358.

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4-1BBL在人口腔鳞癌PBL-SCID鼠嵌合模型肿瘤免疫中的作用

孙顺涛1,杨宏宇2,罗娟2,朱国光1,来映明1,杨辉俊2   

  • 出版日期:2012-10-10 发布日期:2012-10-10

  • Online:2012-10-10 Published:2012-10-10

摘要:

目的:探索建立人口腔鳞癌PBL-SCID鼠嵌合模型,评价4-1BBL在人口腔鳞癌PBL-SCID嵌合模型肿瘤免疫中的作用。方法:SCID鼠右背部皮下注射5×106 (0.2 mL)Tca8113细胞。成瘤后,尾静脉注射anti-asialo-GML多抗,随机分为4组,第1组为对照组,不给予成瘤小鼠免疫重建,第2组给予成瘤小鼠免疫重建,第3组给予成瘤小鼠免疫重建+含有空载体的腺病毒做肿瘤内注射,第4组给予成瘤小鼠免疫重建+含有4-1BBL基因的腺病毒做肿瘤内注射。第2、3、4组小鼠腹腔注射健康志愿者外周血淋巴细胞3×107(0.5 mL),第1组腹腔注射0.5 mL1640培养基。每周记录各组小鼠的成瘤情况,免疫重建后,第2、7周取鼠血,用ELISA法测定人IgG含量。小鼠处死后,比较各组小鼠体重及肿瘤、脾脏的重量。RT-PCR检测4-1BBL基因在瘤体内的表达,HE染色检测肿瘤及脾脏生长情况。结果:模型成瘤率为100%,成瘤潜伏期12~18 d。免疫重建后第2、7周时人口腔癌PBL-SCID嵌合组小鼠血中人IgG分别达71.8 μg/mL、136.9 μg/mL。免疫重建及转染4-1BBL基因组小鼠,肿瘤生长受到明显抑制(P<0.01)。RT-PCR证明4-1BBL基因在瘤体内充分表达,冰冻切片HE染色见肿瘤生长、脾脏有大量淋巴细胞浸润。结论:SCID小鼠皮下注射口腔鳞癌细胞、腹腔注射人淋巴细胞,可建立人口腔鳞癌PBL-SCID嵌合模型,经腺病毒转染4-1BBL基因后,可显著提高宿主对瘤体的抑制作用。