中国口腔颌面外科杂志 ›› 2009, Vol. 7 ›› Issue (4): 331-336.

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TIMP-2 对人成釉细胞瘤裸鼠移植瘤生长的抑制作用

张磊涛,黄洪章,曾东林,等   

  • 出版日期:2009-08-10 发布日期:2009-08-10

  • Online:2009-08-10 Published:2009-08-10

摘要: 目的:研究TIMP-2基因转染对人成釉细胞瘤裸鼠移植瘤侵袭性生长的抑制作用。方法:实验分为空白对照组(Opti-MEM)、脂质体转染组(脂质体+Opti-MEM)和质粒转染组[pcDNA3.1(+)/GFP-TIMP-2+脂质体+Opti-MEM]。将以上各组液体混合注射于移植瘤的周围,每3天1次,共3次。采用RT-PCR分析移植瘤MMP-2及TIMP-2 mRNA的表达, Western 印迹分析移植瘤MMP-2及TIMP-2蛋白的表达,测定移植瘤体积和瘤重。应用SPSS11.0 软件包对所得数据进行统计学分析。结果:接种AM 组织块后,裸鼠生长良好,所有裸鼠在实验终止前均存活。 接种AM 组织块后1 周末,可见裸鼠的接种处皮下有小结节,颜色与皮肤颜色相近,随皮肤移动而移动;2 周末,小结节稍有增大,并且固定于皮下,不随皮肤的移动而移动,小结节表面较第1 周略圆;实验终止时,所有移植瘤都有不同程度的增大。与对照组比较,质粒转染组移植瘤的生长速度在接种后4 周明显降低。接种后第5周末,质粒转染组移植瘤的生长速度略有增加。自第1 周末开始至实验终止时,质粒转染组移植瘤的体积均小于对照组。各组MMP-2 mRNA 表达平均值无变化,三者之间无显著性差异,P>0.05。质粒转染组的TIMP-2 mRNA 表达水平与空白对照组和空脂质体转染组比较均显著增加(P<0.05)。与空白组比较,质粒转染组的TIMP-2 mRNA 表达相对增加率为35.72%。质粒转染组MMP-2 表达平均值比值为0.38,MMP-2 蛋白抑制率为47.36%。质粒转染组MMP-2 表达显著低于空白组,P<0.05。质粒转染组TIMP-2 表达平均值比值为0.86,TIMP-2 蛋白增加率为54.65%。质粒转染组TIMP-2 表达显著高于空白组,P<0.05。结论:AM移植瘤的生长抑制,可能是由于TIMP-2基因过表达后,特异性抑制MMP-2 蛋白所致。