中国口腔颌面外科杂志 ›› 2009, Vol. 7 ›› Issue (1): 38-43.

• • 上一篇    下一篇

Nell-1型分子基因对大鼠骨髓基质细胞成骨分化的影响

胡镜宙,蒋欣泉,张志愿,张秀丽   

  • 出版日期:2009-02-10 发布日期:2009-02-10

  • Online:2009-02-10 Published:2009-02-10

摘要: 目的:研究Nel-like 1型分子(Nell-1)基因对体外培养大鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells, bMSCs)成骨分化的影响。方法:实验分为未转染组、转染β-半乳糖苷酶(β-Galactosidase,LacZ)基因的LacZ组以及转染Nell-1基因的Nell-1组。取6周龄雄性Fischer 344大鼠胫骨和股骨骨髓体外培养,以腺病毒为载体,进行基因转染。以反转录PCR和Western印迹法验证bMSCs中Nell-1基因的表达。以碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性定量测定、骨钙素(osteocalcin,OC)含量测定和Von Kossa法检测Nell-1基因转染对bMSCs成骨分化的影响。采用SAS 6.04软件包对数据进行随机设计的方差分析(ANOVA-SNK)。结果:Nell-1组可检测到Nell-1基因转录水平和蛋白水平的表达,未转染组和LacZ组未见明显Nell-1基因表达。Nell-1组ALP活性在转染后3d、6d和9d均高于LacZ组和未转染组。Nell-1组在转染后14d、28d时, OC含量分别为(1.23±0.05)ng/mL和(1.31±0.06)ng/mL,高于未转染组的(0.81±0.09)ng/mL和(1.00±0.05)ng/mL,以及LacZ组的 (0.92±0.08)ng/mL和(1.02±0.04)ng/mL。钙结节数Nell-1组在转染后21d和28d分别为4.5±1.1和16.2±2.5,高于未转染组的0.8±0.7和3.2±1.2以及LacZ组的0.7±0.5和3.7±0.8,其差异均有显著性 (P<0.05)。结论:Nell-1基因可促进体外培养bMSCs的成骨分化。